029-866905091 實驗室的環(huán)境和設(shè)施
法醫(yī)DNA實驗室對環(huán)境和設(shè)施嚴(yán)格控制,實行分區(qū)域管理和定期清潔制度,是避免DNA污染的有效手段。
1.1 實驗室分區(qū)
由于法醫(yī)DNA檢驗的高靈敏性,為了防止檢驗過程中的交叉污染,法醫(yī)DNA實驗室應(yīng)建立實驗室分區(qū)和授權(quán)進(jìn)入制度,各區(qū)域間的通風(fēng)、排氣系統(tǒng)不得混用,無關(guān)人員不得進(jìn)入實驗區(qū)域,不同區(qū)域的實驗設(shè)備及器械不得混用。
DNA實驗室的分區(qū)域管理,能夠保證在不同的實驗區(qū)域內(nèi)完成不同的檢驗,按照DNA含量由少到多的順序,實現(xiàn)檢材和樣本的單方向流動。DNA實驗室必須設(shè)置案件受理和檢材保管區(qū)、樣品DNA提取區(qū)、DNA擴(kuò)增區(qū)、DNA檢測區(qū)，有條件的實驗室還應(yīng)設(shè)置初檢區(qū)、結(jié)果分析區(qū)、準(zhǔn)備區(qū)等,其中DNA擴(kuò)增區(qū)和檢測區(qū)還應(yīng)設(shè)置緩沖區(qū),供技術(shù)人員更換工作服。對于微量DNA的檢驗,如接觸DNA等,由于檢材含有的DNA量少,更存在污染的危險,要設(shè)置專門的DNA提取區(qū)域。
PCR污染是法醫(yī)DNA實驗室的特點(diǎn),也是實驗室污染防范的重點(diǎn)。在PCR擴(kuò)增產(chǎn)物或等位基因標(biāo)準(zhǔn)對照物中含有高濃度的DNA目的片段,極少的量就會被檢測到,實驗室一旦發(fā)生此類污染,將很難清除,后果嚴(yán)重。對實驗室實行分區(qū)管理,嚴(yán)格按要求操作,能夠有效地預(yù)防污染發(fā)生,其中重點(diǎn)要對DNA檢測區(qū)進(jìn)行嚴(yán)格管理。含有擴(kuò)增產(chǎn)物或?qū)φ瘴锏碾x心管只能在DNA檢測區(qū)打開,不允許帶出該區(qū)域;處理檢測區(qū)的廢物時要封裝嚴(yán)密;技術(shù)人員進(jìn)出該區(qū)域要更換工作服。
1.2 實驗室清潔
做好實驗室的清潔工作是防止DNA實驗室內(nèi)發(fā)生交叉污染的有效途徑。造成DNA交叉污染的原因多種多樣,主要是物證檢材之間或比對樣本與物證檢材之間的相互污染。DNA交叉污染的方式可以是直接接觸造成,也可以是通過一定的載體使外源DNA發(fā)生轉(zhuǎn)移造成,使DNA檢驗結(jié)果錯誤;前者容易發(fā)現(xiàn)和預(yù)防,后者則較難發(fā)現(xiàn)和預(yù)防,這要求實驗室要做到定期清潔和消毒。
實驗室的清潔范圍包括對工作臺面、儀器設(shè)備表面、重復(fù)使用的工具或器皿等的清潔。工作臺面重點(diǎn)部位包括實驗室受理檢材的柜臺、DNA提取工作臺、吸取DNA的超凈臺和檢材存儲柜等都是容易接觸并遺留DNA的區(qū)域;儀器設(shè)備主要有離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭、提取DNA用的加熱塊、擴(kuò)增儀的樣品槽、移液器桿的吸孔、遺傳分析儀的加樣槽等;重復(fù)使用的工具或器皿主要有剪取檢材樣本使用的剪刀及鑷子、配制試劑所用的試劑瓶等。
實驗室清潔主要是采用擦拭清洗的辦法,先用新鮮配制的10%漂白液(7mM次氯酸鈉溶液)將需要清理物體的表面反復(fù)擦拭,再用75%乙醇擦洗以去除殘留物,可以有效清除它們表面附著的各種污染物,條件允許的情況下定時進(jìn)行紫外燈照射消毒。實驗室除要建立定期清潔制度外,一旦發(fā)現(xiàn)在檢驗過程中有可能發(fā)生DNA污染時,要及時清理和清潔。
今天關(guān)于實驗室防污染已經(jīng)為您介紹到這里，實驗室建設(shè)和使用注意事項繁多，需要我們建設(shè)者和使用者不斷學(xué)習(xí)，希望今天的文章對您有所幫助。
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