防污染的科學(xué)做法

發(fā)布時間：2019.12.02 瀏覽次數(shù)：

實驗室常見的防止污染的方法，今天陜西宏碩實驗室小編就為大家介紹一些實際防污染的方法。
合理的實驗室分區(qū)：
實驗室內(nèi)各工作區(qū)的實驗用品，包括移液器等應(yīng)專用。如有可能，應(yīng)在裝有紫外燈的層流式工作臺（如生物安全柜、超凈工作臺）內(nèi)，吸加PCR試劑，工作臺內(nèi)應(yīng)放置PCR專業(yè)用的微量離心機、一次性手套、各量程的移液器和其他必須物品。
正確的實驗操作：
吸加PCR試劑和模板的操作應(yīng)嚴格按要求進行，吸樣要慢，盡量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或產(chǎn)生氣溶膠污染。
實驗的過程中應(yīng)勤換手套，在進出不同區(qū)域或進行模板操作后，都應(yīng)及時更換手套。
裝有PCR試劑的微量離心管在打開之前應(yīng)先做瞬時離心（約10s），將管壁及管蓋上的液體甩至管底部，從而減少污染手套或加樣器的機會。開管動作要輕，以防管內(nèi)液體濺出或形成氣溶膠，造成污染。
在同時進行多個PCR反應(yīng)時，應(yīng)制備主反應(yīng)混合液，再分裝至PCR反應(yīng)管，最后添加樣品核酸模板，以減少單個添加操作繁瑣造成的污染。
實驗器具和試劑：
防污染
實驗室自己配置的試劑，如去離子水、緩沖液等，在使用之前均應(yīng)高壓滅菌或過濾除菌。
分裝PCR試劑：所有的PCR試劑都應(yīng)小量分裝，以減少重復(fù)取樣次數(shù)，并置于-20℃保存，適當(dāng)時，最好做到專人專用。另外，PCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開保存，不應(yīng)放于同一冰盒或冰箱。
所有吸頭、反應(yīng)管等應(yīng)一次性使用，使用之前，都應(yīng)經(jīng)過高壓處理。若條件允許，最好使用帶濾器的槍頭。各工作區(qū)內(nèi)的移液器要有標識，應(yīng)固定使用用途，不能交叉使用。
實驗設(shè)計：
實驗設(shè)計方面應(yīng)遵循實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制的相關(guān)規(guī)定，實驗中至少應(yīng)：
設(shè)置目標DNA陽性對照反應(yīng)。對靶序列所作的適當(dāng)?shù)南♂尮ぷ鲬?yīng)于實驗前在實驗室內(nèi)別的位置進行，這樣可防止將靶DNA的濃溶液帶到實驗室中專門進行PCR的位置。
設(shè)置PCR試劑陰性對照和目標DNA陰性對照反應(yīng)。
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